产品货号:
KD2522
中文名称:
X-α-gal ,试剂级别
英文名称:
X-α-gal
产品规格:
10mg|25mg|25mg×10|100mg|250mg|250mg×10|1g
发货周期:
1~3天
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X-α-Gal是α-半乳糖苷酶(MEL1)的显色反应底物,更为常见的X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的显色反应底物。α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal底物,并生成蓝色的产物。通过肉眼可见的蓝白斑筛选,可快速而简便的识别阳性克隆。
MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码外泌型的α-半乳糖苷酶。如果蛋白无互作,报告基因MEL1不表达,菌落呈乳白色;如果蛋白发生互作,报告基因MEL1表达,菌落呈蓝色,亦可根据菌落蓝色深浅,初步判断蛋白互作强度。
中文别名:5-溴-4-氯-3-吲哚基-alpha-D-吡喃半乳糖苷
英文别名:X-α-Gal,X-alpha-Gal,5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-α-D-galactoside
CAS号:107021-38-5
分子式:C14H15BrCNO6
分子量:408.64
溶解性:溶于DMF(二甲基甲酰胺)和DMSO(二甲基亚砜),酵母杂交实验常使用DMF溶解;在甲醇中溶解度为1%
- 用于筛选含X-α-半乳糖苷酶基因的阳性酵母或细菌菌株。在固体培养基上直接检测酵母双杂交相互作用。
- 用于区分肠杆菌科内的不同菌种,以及区分双歧杆菌和乳酸菌;
- 在组织化学中用于酶活性的检测。
组分 | 10mg | 25mg | 100mg | 250mg | 1g | ||
X-α-gal | 10mg | 25mg | 100mg | 250mg | 1g | ||
说明书 | 1份 |
保存:-20℃
X-α-GAL(20mg/mL):取20mg X-α-GAL溶于1mL DMF中,或等比例放大,过滤除菌。
- 方法一,涂布于预制平板
- 临用前,使用X-α-Gal稀释液(也可以用DMF)将X-α-Gal母液稀释至4mg/mL(请于超净台无菌操作,按需稀释,稀释后的X-α-Gal勿久存)。
- 4mg/mL的X-α-Gal溶液,在Φ15cm平板涂布200μL,或者在Φ10cm平板涂布100μL。
- 置于超净台或者37℃培养箱至液体被吸收(可以置于超净台避光过夜晾干)。
- 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌斑出现。
- 临用前,使用X-α-Gal稀释液(也可以用DMF)将X-α-Gal母液稀释至4mg/mL(请于超净台无菌操作,按需稀释,稀释后的X-α-Gal勿久存)。
- 方法二,直接加入培养基
- 将已灭菌固体培养基冷却至50~55℃。
- 20mg/mL X-α-Gal母液,在100mL固体培养基中加入100~200μL混匀,快速倒平板。在培养基中X-α-Gal的终浓度是20~40μg/mL。
- 将已灭菌固体培养基冷却至50~55℃。
携带MEL1基因的酵母菌株:
Y2HGold、Y190、AH109、Y187、PG69-2A。
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